5-羥色胺檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）（超敏）
通用名稱：5-羥色胺檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）（超敏）
英文名稱：(簡寫:5-HT)ELISA
產(chǎn)品貨號：RE59141
產(chǎn)品規(guī)格：96T
產(chǎn)品品牌：德國IBL
5-HT試劑盒預(yù)期用途
5-HT試劑盒可用于低濃度及小體積樣本中五羥色胺的定量檢測。僅用于科研使用。
前言簡介 五羥色胺是色.氨.酸代謝的中間產(chǎn)物，它主要存在于腸嗜鉻細胞、血清素激活的神經(jīng)元和血小板中，它已被確定為是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一種神經(jīng)遞質(zhì)。可以在腸粘膜的嗜鉻細胞、血小板及腦血清素激活的神經(jīng)元中發(fā)現(xiàn)高濃度的五羥色胺。中樞血清素的神經(jīng)元可以影響生理功能，如睡眠和激素水平的調(diào)整。血清中五羥色胺水平的增高可見于惡性類癌、內(nèi)源性抑郁癥及精神分裂癥。
5-HT試劑盒檢測原理
將樣品分別與酰化試劑一起溫育后可以得到酰化的五羥色胺。此實驗采用的是競爭性ELISA的原理，酰化的五羥色胺與抗血清競爭性結(jié)合到一定數(shù)量的抗體結(jié)合位點上。當反應(yīng)系統(tǒng)達到平衡后，洗板除去未結(jié)合抗原及抗血清復(fù)合物。結(jié)合在固相上的抗體被抗兔的過氧化物酶檢測到，在450nm處檢測底物液與過氧化物酶的反應(yīng)。結(jié)合到固相上的五羥色胺抗體的量與樣品中五羥色胺的濃度成反比。
儲存條件
5-HT試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。打開了的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃下。 
5-HT試劑盒組成成分
數(shù)量 | 標記 | 成分 | | 1×12×8 | MTP | 包被板，可拆，微孔中包被五羥色胺 | | 1×4ml | CAL CONC | 標準品濃縮型，濃度500ng/mL | | 1×2×4ml | CONTROL 1+2 | 質(zhì)控品1+2，濃縮型（500×）濃度及范圍詳見質(zhì)控單。 | | 1×4ml | ACYL BUF LOY | 酰化液，凍干粉 | | 1×1ml | ACYL BUF LOY CONC | 酰化液，濃縮型，黃色。 | | 4×2.5ml | ACYLREAG
LYO | 酰化試劑，凍干粉 | | 1×3ml | DEAC | 鈍化劑，即用，藍色 | | 1×12ml | ENZCONJ | 酶聯(lián)物，即用。 | | 1×20ml | WASHBUF CONC | 洗滌液，25倍濃縮 | | 1×12ml | TMB SUBS | 底物液，即用 | | 1×12ml | TMB STOP | 終止液，即用，內(nèi)含0.3M硫酸 | | 2×6ml | SOLVENT | SOLVENT 溶劑。即用。 | | 1×2ml | ASC ACID | 抗壞血酸即用。內(nèi)含10%抗壞血酸 | | 1×50ml | ASSAYBUF | 檢測緩沖液使用前需加入抗壞血酸。內(nèi)含10mM PBS
（0.9% NaCl），穩(wěn)定劑。 |
實驗所需器材但試劑盒不提供
●移液器，體積：10;20;25;50;100;200μl
●用于標準品稀釋的聚丙烯（PP）試管或聚丙烯（PP）微量試管
●試管架
●軌道搖床（500rpm）
●旋渦混合器
●帶儲器的8道移液器
●洗滌瓶，自動或半自動洗板機
●可在450nm處讀數(shù)的酶標儀（參考波長：570-650nm）
●雙蒸水或去離子水
●吸水紙、取樣吸頭和計時器
5-HT試劑盒檢測步驟 | 1 | 將酰化的標準品、酰化的質(zhì)控品和酰化的樣品各50μl加入到相應(yīng)的微孔中。 | | 2 | 粘合鋁箔覆蓋微孔板，在2-8℃孵育15-10小時（過夜） | | 3 | 移取粘合鋁箔，棄去孵育液，每孔用250ul稀釋的洗滌液洗滌微孔板4次，在紙巾上拍干除去殘余液體。 | | 4 | 在每一微孔中加入100μl酶聯(lián)物。 | | 5 | 蓋板，室溫（18-25℃）下?lián)u床振蕩（500rpm）溫育60min。 | | 6 | 移去粘合鋁箔，棄去孵育液，每孔用250ul稀釋的洗滌液洗滌微孔板4次，在紙巾上拍干除去殘余液體。 | | 10 | 在每一微孔中加入100μlTMB底物液。 | | 11 | 室溫（18-25℃）下?lián)u床振蕩（500rpm）溫育20-30min。 | | 12 | 在每一微孔中加入100μl終止液以終止底物反應(yīng)，輕輕振板以使溶液混合均勻。 | | 13 | 加終止液后15min內(nèi)450nm（參考波長570-650nm）處讀取OD值。 |
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