斑點熱群立克次體IgG ELISA試劑盒（酶聯免疫法） ELISA操作顯色過程常見問題及解答
1） 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2） 使用變質的顯色劑。 3） 未使用完畢的顯色劑返回原瓶造成污染 4） 顯色反應不避光，或有陽光直射
解決辦法：
1） 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用；
2） A、B 液應避免接觸金屬器械。 3） 使用量根據樣本需要量取，取出后未使用完畢的顯色液應棄去，不能再次返回原試劑瓶，以免造成顯色液污染，影響下次使用； 4）TMB對光敏感，一般顯色反應要避光進行；
斑點熱群立克次體IgG ELISA試劑盒詳細表
| 中文名稱 | 斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒（酶聯免疫法） | | 英文名稱 | Spotted fever Group Rickettsia EIA IgG Antibody Kit | | 產品貨號 | SFG-96k | | 產品規格 | 96T | | 檢測樣本 | 血清、血漿 | | 適應物種 | 人 | | 預期用途 | 用于人血清、血漿中抗斑點熱群立克次體IgG的體外定性檢測 | | 產品品牌 | 美國fuller | | 供應商家 | 深圳市科潤達生物工程有限公司 |
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒預期用途
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒用于人血清、血漿中抗斑點熱群立克次體IgG的體外定性檢測。
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒成分
| 名稱 | 數量 | 成分作用 | | 微孔板 | 12×8 | 包被有斑點熱群立克次體外脂多糖抗原（rLPS） | | 樣品稀釋液 | 2×50ml | 含牛血清蛋白及吐溫20、Mercury sulfide的PBS緩沖液 即用型 | | 酶聯物 | 1×12ml | 辣根過氧化物酶標記的抗人IgG 即用型 避光保存 | | 陽性質控 | 1×120μl | 1:10預稀釋 | | 臨界質控 | 1×200μl | 1:10預稀釋 | | 陰性質控 | 1×120μl | 1:10預稀釋 | | 底物液 | 1×12ml | 琥珀色瓶，含TMB底物液以及Hydrogen peroxide 即用型 避光保存 | | 終止液 | 1×12ml | 含稀釋好的硫酸 即用型 避免接觸皮膚 | | PBS緩沖液 | 吐溫20 1×2ml | 將試劑盒提供的小包加入到1L蒸餾水中 以配置PBS緩沖液
加入到1L的PBS緩沖液中 配制成洗液。 |
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒檢測原理
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒微孔板中包被有從斑點熱群立克次體中提取出的脂多糖（rLPS）。病人血清用樣品稀釋液稀釋，之后樣品被加入到微孔中孵育。孵育過程中，血清抗體與微孔板抗原發生特異性結合。洗板洗去未結合的部分，之后加入酶標的抗人IgG。
孵育過后洗板，洗去未結合上的酶聯物。之后加入酶底物液反應。形成藍色，顏色的深度與樣品中特異性IgG的濃度成正比。定時反應后，加入終止液，顏色變黃，微孔板使用酶標儀在450nm下讀取吸光值。
斑點熱群立克次體IgG實驗檢測所需材料（試劑盒內不提供）
| ★ | 蒸餾水 | | ★ | 洗瓶 | | ★ | 試管 | | ★ | 移液器 | | ★ | 粘性蓋板 | | ★ | 450nm讀數酶標儀 |
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒儲存及穩定
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒應2-8℃保存，在實驗前應先平衡至室溫（20-25℃）剩余的微孔板需密封保存在包裝袋中。
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒檢測步驟
| 1. | 移取陽性質控、陰性質控、臨界質控、樣品各100μl到相應的微孔中，臨界質控做雙孔檢測。 | | 2. | 蓋板，在室溫下孵育60分鐘 | | 3. | 使用洗滌液洗板至少3次，并在吸水紙上拍干。 | | 4. | 每孔加入100μl酶聯物 | | 5. | 蓋板，在室溫下避光孵育30分鐘 | | 6. | 洗板同步驟3 | | 7. | 每孔加入100μl TMB底物液，暗光下準確孵育10分鐘 | | 8. | 每孔加入100μl終止液 | | 9. | 使用酶標儀在450nm波長下讀取吸光值 |
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒檢測期望值
由于地域及檢測人口的不同，檢測值也會存在差異。在病區中，癥狀不明顯或者只出現輕微癥狀的病人的檢測，血清陽性率約為1%~26%。
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