人可溶性α–klotho蛋白酶免試驗
人可溶性α–klotho蛋白試劑盒產品詳細 中文名稱 | 人可溶性α–klotho蛋白試劑盒 | 英文名稱 | Human soluble alpha-klotho protein kit | 產品貨號 | 27998 | 產品規格 | 96T | 檢測樣本 | 血清、血漿、尿液 | 適應物種 | 人 | 預期用途 | 可用于血清,血漿和尿液中人可溶性α–klotho的定量檢測 | 產品品牌 | 日本IBL | 供應商家 | 深圳市科潤達生物工程有限公司 |
人可溶性α–klotho蛋白檢測試劑盒實驗原理 人可溶性α–klotho蛋白檢測試劑盒根據酶免法的夾心原理,利用兩種不同的高特異性抗體,TMB作為著色劑,顏色強度與人可溶性α–klotho的量成正比
人可溶性α–klotho蛋白試劑盒檢測范圍 93.75~6000pg/mL
人可溶性α–klotho蛋白試劑盒預期用途 人可溶性α–klotho蛋白試劑盒可用于血清,血漿和尿液中人可溶性α–klotho的定量檢測。
人可溶性α–klotho蛋白試劑盒組成
名稱 | 數量 | 成分 | 包被板 | 96孔 | 包被有抗人可溶性α–klotho(67G3)小鼠IgG單抗,親和純化 | 標記抗體濃縮30X | 0.4mlx1 | HRP標記的抗人可溶性α–klotho小鼠IgG Fab’,親和純化 | 標準品 | 0.5mlx2 | 重組人可溶性α–klotho | EIA緩沖液 | 30mlx1 |
| 標記抗體稀釋液 | 12mlx1 | 1%BSA,含0.05%吐溫20的PBS | 著色劑 | 15mlx1 | TMB底物液 | 終止液 | 12mlx1 | 1N硫酸 | 洗滌緩沖濃縮液 40X | 50mlx1 | 含0.05%吐溫20的磷酸緩沖液 |
人可溶性α–klotho蛋白檢測實驗所需材料但試劑盒未提供 ■酶標儀(450nm) ■移液器和槍頭 ■燒杯 ■蒸餾水 ■孵箱(37±1℃) ■坐標紙(對數-對數) ■吸水紙 ■標準品稀釋管 ■洗瓶 ■一次性試驗管

人可溶性α–klotho蛋白試劑盒實驗步驟 使用前,所有樣品應平衡至室溫,大約30min,然后充分混勻,確保試劑質量無變化,標準曲線和樣品檢測同時進行
試劑 | 檢測樣品 | 標準品 | 檢測樣品對照孔 | 試劑對照孔 | 檢測樣品100ul | 稀釋標準品(1-7管)100ul | EIA緩沖液(第8管) 100ul | EIA緩沖液100ul | 蓋板,室溫下溫育60min | 洗板4次 | 酶標抗體 | 100ul | 100ul | 100ul | - | 蓋板,室溫下溫育30min | 洗板4次 | 顯色劑 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 室溫避光溫育30min | 終止液 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 加終止液后30min內450nm處讀取OD值 |
1.確定好空白對照孔,并在相應的微孔中加入100ul EIA緩沖液。 2.確定好樣品對照孔,檢測樣品孔和標準品孔,然后分別將100ul樣品對照品、檢測樣品和稀釋好的標準品加入到相應的微孔中。 3.蓋板,室溫下溫育60min 4.在微孔中加入350ul以上的洗滌液,浸泡15-30秒,棄去洗滌液。重復4次,后在吸水紙上拍干; 5.每孔加100ul酶標抗體,除試劑空白對照孔外 6.蓋板,室溫下溫育30min 7.按照步驟4)洗板5次 8.將所需量的顯色劑加入到試管中,然后在每一微孔中加入100ul顯色劑。為了避免污染,請勿將剩余試劑在倒入原裝試劑瓶中。 9.室溫避光溫育30min,加入顯色劑后溶液顏色會變成藍色 10.在每孔加100ul終止液,此時溶液顏色會變成黃色 11.擦去微孔板底部的污點或水滴,終止液加入后30min內,在酶標儀450nm處讀數
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