此試劑盒是科研用途，不屬于醫療器械 血管緊張素 I (血漿腎素活性)檢測試劑盒
【產品名稱】 通用名稱：血管緊張素 I （血漿腎素活性）檢測試劑盒（酶聯免疫法） 英文名稱：Angiotensin I (PRA) ELISA
【產品規格】 96T
【預期用途】 該試劑盒可用于檢測PRA（血漿腎素活性），檢測方法是通過測量單位時間每體積里產生的血管緊張素-1（Ang-1）的質量。（ng/ml.h）
【前言簡介】 測量PRA值對于臨床評估高血壓病人的身體狀況是非常有用的。尤其可用于診斷原發性醛固酮增多癥（占高血壓患者5-13%）并且幫助治療和管理其他類型的高血壓患者。相比與檢測腎素濃度，該檢測方法能更準確的檢測原發性醛固酮增多癥。原因如下： PRA值是血管緊張素-1的生成率，它是通過腎素的酶促作用，由底物血管緊張素原轉變而來。這就在依賴腎素濃度的同時，也需要依賴血管緊張素原的濃度。而這在腎素濃度檢測中是被忽略掉的。 在低濃度的情況下，血漿腎素濃度測試的靈敏度得不到保證。而PRA分析卻可以通過延長生成步驟中的溫育時間來提高靈敏度。 當抑制劑結合腎素活性位點時，PRA就會被抑制。而在有抑制劑的情況下，腎素卻依舊能被相應的抗體所識別出來。因此腎素濃度并不總是和血漿腎素活性相關。
腎素將血管緊張素原轉化為血管緊張素-1，然后大部分1型在肺循環中被血管緊張素轉換酶（ACE）轉變為2型。2型血管緊張素能夠通過一系列作用升高血壓：收縮小動脈、促進鈉的重吸收、刺激腎上腺皮質分泌醛固酮。醛固酮同樣也會影響鈉的代謝并升高動脈血壓。 由于血管緊張素-2在血液樣本中非常不穩定，因此非常難以準確地測量其在循環 系統中的濃度。但是醛固酮的濃度卻能用IBL公司生產的試劑盒輕松的檢測出來。
【檢測原理】 1.生成步驟 采集EDTA血液，分離出血漿。分離出的血漿應該在室溫下立即用于檢測，如果不能，需冷凍保存。樣本在采集和未調節PH前的處理過程中，不能放在冰上或者在0-10℃間保存。這樣會導致測量出的結果偏高。實驗開始前需加入蛋白酶抑制劑和生成緩沖液，這樣能夠防止血管緊張素-1在血漿中被降解。加入緩沖液后，樣本PH會在6.0左右。之后把樣本分成兩部分，一部分在0-4℃，另一部分在37℃下準確溫育90分鐘或者更長時間，這個過程中血漿腎素會催化底物生成血管緊張素-1。把PH調整到6.5或者7.4。這一步驟非常關鍵，一旦酸化到PH3.3或者更低再調回中性就會造成腎素不可逆的活化；而如果PH大于8.0，那就會破壞掉腎素。該溫育的過程牽涉到了另一組蛋白酶抑制劑，它能在終止生成反應的同時，防止血管緊張素-1被降解成小段的肽鏈。 2.測量步驟 該檢測使用競爭法，有2個溫育步驟，總溫育時間不到2個小時。*次溫育時，未標記的血管緊張素-1（樣本、標準品以及質控品中的）與生物素化的血管緊張素-1競爭抗體。鏈霉親和素標記的辣根過氧化物酶連結到固化的生物素-血管緊張素-1上。洗板洗去未結合的材料。然后加入酶底物液反應，反應一段時間后加入終止液并測量吸光值。吸光值大小與樣本中血管緊張素-1濃度成反比。標準品的值可用于繪制標準曲線，樣本的值可直接在標準曲線上讀出。 【試劑盒組成成分】 生成緩沖液 | 1×5ml | 含緩沖液和無毒性的抗生素 |
| 現配 | 加0.5ml95%乙醇到瓶中，*溶解。使用后冷藏，不用時請勿開蓋（蛋白酶抑制劑） | 微孔板 | 2×12×8 | 2個96孔的微孔板，包被有抗血管緊張素-1抗體、包裝袋中含干燥劑 | 生物素化A-Ⅰ | 1×30ml | 緩沖液、蛋白酶抑制劑、生物素化血管緊張素-1、無汞防腐劑 | 親和素-HRP | 1×0.5ml | 蛋白緩沖液、親和素-HRP復合物、無汞防腐劑、檢測前用分析緩沖液1：100稀釋、8小時穩定 | 標準品 | 8× | 含合成A-Ⅰ多肽、蛋白合成液、無汞防腐劑標準品A 2ml B-H 0.7ml 濃度0、0.2、0.5、1.4、4、10、25、60ng/ml （體積為近似值，實際體積請看瓶上標簽） | 質控品 | 2×0.7ml | 含血管緊張素-1、蛋白緩沖液、無汞防腐劑、具體濃度見瓶身標簽 | 分析緩沖液 | 1×40ml | 蛋白緩沖液、無汞防腐劑 | 洗液濃縮液 | 2×50ml | 10倍濃縮、含緩沖液、非離子型洗滌劑、無汞防腐劑、使用前1:10稀釋 | TM底物液 | 1×32ml | 含四甲基聯苯胺、雙氧水、不含DMF、DMSO | 終止液 | 1×12ml | 含1M硫酸 |
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